科普〡血浆EGFR检测的可行性及意义

一、开展血浆中EGFR检测的必要性

肿瘤的生物学信息是肿瘤研究的万世之源，而组织标本则是反映肿瘤信息的主要载体。但是在临床实践中，获得充足的组织标本似乎仅是一种理想状态，尤其对于发病即为中晚期的患者来说，组织标本往往经穿刺获得，组织量少，所反映的信息量也较少，病理诊断后的剩余标本量难以满足后续的探索性研究，即使前瞻性临床研究最终能利用组织标本进行有效检测的几率亦仅为30%~40%（如IPASS 研究、FLEX 研究等）。另外，肿瘤的生物学特性在经过一系列治疗后可能已经发生改变，故每次治疗前实时获得肿瘤信息才能较准确地反映肿瘤细胞特性，而疾病进展后再次获取组织标本可谓难上加难。面对诸多的困难和局限，另辟蹊径、探寻组织标本的替代者自然成为一条明智之路。

利用组织标本进行有效检测的几率亦仅为30~40%，多种原因导致无法获得组织标本（如老人拒绝活检、晚期无法手术、转院过来的化疗后进展），部分病人在EGFR状态不明情况下用了TKI，部分病人因此错过TKI获益机会。

二、血浆检测的优势及可靠性

1、全覆盖（可以采到每个病人的血样）

2、无创性和简便性

3、血浆游离DNA患者血浆中有足够的游离DNA (是正常人的10倍以上)ctDNA（循环肿瘤DNA）主要由凋亡和坏死的肿瘤细胞产生，其遗传学特性与肿瘤基因组DNA相似

4、肿瘤组织标本与血浆标本的检测一致率为84.9% (73/86)与组织标本相比，血浆标本进行EGFR突变检测的敏感性和特异性分别为67.5% (27/40)和100% (46/46)。来自于北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院胸部肿瘤中心，对230 例晚期NSCLC 患者的配对组织和血浆中EGFR 突变的检测结果进行分析，一致性为78%，以组织标本检测为金标准，外周血检测的假阳性18.8%，假阴性20.2%。外周血EGFR 突变预示良好的疗效与无病进展生存期。

三、血浆采集建议

样本量：采集EDTA抗凝全血10ml， 2小时内进行血浆分离（如发生溶血现象重新采集），确保分离得到的血浆至少在2mL以上。如果采集后的全血未能及时分离，可保存于2-8度冰箱，但不宜超过2小时。

最适合检测对象：IIIb-IV期的NSCLC患者

提取及保存：分离后的血浆立即提取核酸，若未能及时提取可保存在-20度冰箱备用，保存时间不宜超过一周。

备注：建议采用艾德配套血浆提取试剂盒进行DNA的分离提取。血浆足够时，可4ml一同提取DNA，最后洗脱时，浓缩在一起，提高检测成功率。（病理科）